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酶標儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同. 圖示是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算，最后由顯示器和打印機顯示結(jié)果. 微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測，因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單.

微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.

光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光，但對綠色不吸收，反射出來，所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。

檢測單位

光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。

檢測單位用OD值表示， OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=log（1/trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關系：

E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度， Ιo 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。

OD值由下述公式計算：

c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子

在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。

但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

檢測值計算

儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中，檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值

的計算如下：

T=（Meas—Min）/（Max—Min）

其中T為透光值， Meas為檢測的二進位數(shù)值， Min為在 0%的情況下檢測的二進位數(shù)值， Max為在100%的情況下檢測的二進位數(shù)值，舉例如下：

MaX=3600

Min=20

Meas=30

T=（30-20）/3600-20)=0．0028

OD=log（1/T）=log（1/0.0028）=2.552

中心定位

儀器會自動對酶標孔進行中心定位，中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時，儀器其實要進行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。

光源的參照通道

參照通道是用來校準由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。

用途和其它提示

用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實驗室，包括臨床實驗室。

質(zhì)量控制

質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。

空白校正

有一些試劑盒的說明書將空白孔設置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設置是用試劑來設置的，請按照試劑盒的說明書要求進行。

檢測結(jié)果的解釋

由于有相當多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標板反應的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行.

結(jié)構(gòu)

規(guī)格有40孔板，55孔板，96孔板等多種，不同的儀器選用不同規(guī)格的孔板，對其可進行一孔一孔地檢測或一排一排地檢測.

酶標儀所用的單色光既可通過相干濾光片來獲得，也可用分光光度計相同的單色器來得到.在使用濾光片作濾波裝置時與普通比色計一樣，濾光片即可放在微孔板的前面，也可放在微孔板的后面，聚光鏡，光欄后到達反射鏡，經(jīng)反射鏡作90°反射后垂直通過比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管.

從酶標儀工作框圖和光路圖上可看出，它和普通的光電比色計有以下幾點差異：

（l）盛裝待測比色液的容器不再使用比色皿，而是使用塑料微孔板.微孔板常用透明的聚乙烯材料制成，對抗原抗體有較強的吸附作用，故用它作為固相載體.

⑵由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的，光線只能垂直穿過，因此酶標儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的，光束既可是從上到下，也可以是從下到上穿過比色液.

⑶酶標儀通常不僅用A，有時也使用光密度OD來表示吸光度.酶標儀可分為單通道和多通道2種類型，單通道又有自動和手動2種之分.自動型的儀器有X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)，可將微孔板L的小孔一個個依次送入光束下面測試，手動型則靠手工移動微孔板來進行測量.

在單通道酶標儀的基礎上又發(fā)展了多通道酶標儀，此類酶標儀一般都是自動化型的.它沒有多個光束和多個光電檢測器，如 12個通道的儀器設有 12條光束或 12個光源，12個檢測器和12個放大器，在X方向的機械驅(qū)動裝置的作用下，樣品12個為一排被檢測.多通道酶標儀的檢測速度快，但其結(jié)構(gòu)較復雜價格也較高.

摘自《陜西醫(yī)學檢驗》1998.13⑷12

摘要 為提高酶標儀檢測結(jié)果的室內(nèi)重復性和增強室間可比性，對已建立的酶標儀性能評價與鑒定的基該方法進行了詳細解釋和補充，以供同行在評價、鑒定儀器時參考與應用。

可廣泛應用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析（A260/A280）和蛋白定量（A280/BCA/Braflod/Lowery），酶活、酶動力學檢測，酶聯(lián)免疫測定（ELISAs），細胞增殖與毒性分析，細胞凋亡檢測（MTT），報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等

分類 項目名稱 簡　稱

血液學檢驗 血小板相關抗體的檢驗 PAIgA、PAIgG、PAIgM

D-二聚體的測定 D-Dimer

血清纖維蛋白降解產(chǎn)物的測定 FDP

三碘甲腺原氨酸、四碘甲腺原氨酸測定 T3、T4

免疫學檢驗 C反應蛋白的測定 CRP

免疫球蛋白的測定 IgD、IgE

循環(huán)免疫復合物的測定 CIC

類風濕因子的測定 IgG、IgA、IgM類RF

抗甲狀腺球蛋白抗體、微粒體抗體的測定 TG、TM

腫癌免疫學檢測 甲胎蛋白的測定 AFP

癌胚抗原的測定 CEA

前列腺特異抗原的測定 PSA

胰癌、膽道癌、胃癌的測定CA19-9

卵巢癌的測定 CA125

乳腺癌的測定 CA15-3

宮頸鱗癌的測定 SCC

多發(fā)性骨髓癌的測定

甲狀腺癌的測定 hTG

傳染病免疫學檢驗 甲肝血清學的檢測 抗HAV-IgM乙肝血清學的檢測 兩對半

丙肝血清學的檢測 抗HAV-IgG、抗HCV-IgM

丁肝血清學的檢測 抗HDV-IgG、抗HDV-IgM

戊肝血清學的檢測 抗HEV-IgG

腎綜合征出血熱類抗體的檢測 HFRS-IgG

乙型腦炎病毒抗體的檢測 IgM

人類免疫缺陷病毒抗體（即艾滋?。┑臋z測 HⅣ　β 2 M

優(yōu)生優(yōu)育功能檢測 弓形蟲（體）病毒的檢測 TOXO

風疹病毒的檢測 RV

巨細胞病毒的檢測 CMV

單純皰病毒的檢測 抗HSV（Ⅰ、Ⅱ）

其它本儀器還可做基因檢驗及獸殘、農(nóng)殘檢驗項目等

酶標儀（MicroplateReader）是對酶聯(lián)免疫檢測（EIA）實驗結(jié)果進行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的，反應結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。

酶標儀廣泛地應用在臨床檢驗、生物學研究、農(nóng)業(yè)科學、食品和環(huán)境科學中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應用，使得酶標儀在生殖保健領域中應用越來越廣泛，同時促進了生殖健康技術水平提高。

目前國內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目，如：乙肝五項、艾滋病檢測、優(yōu)生優(yōu)育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法，報出的結(jié)果缺乏科學的依據(jù)。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規(guī)定為：陰性對照品的OD值×2.5，通過目測無法判斷標本孔的反應顏色是否超過臨界值。肉眼進行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。

國內(nèi)多家權(quán)威機構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應使用酶標儀判讀，酶免試劑的質(zhì)控也應使用酶標儀，并提供酶標儀測定的原始數(shù)據(jù)，而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的項目往往是一些實質(zhì)性的感染和病變（如：肝炎、艾滋病、優(yōu)生優(yōu)育等），判讀更要求嚴謹，由誤診引起的糾紛很難處理。另外，住院手術病人術前的丙肝、艾滋等EIA試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段，正逐漸被許多單位所采用。

中國免疫診斷方法主要有如下三種：酶免（EIA）、放免（RIA）和發(fā)光，在市場上的情況如下：

方法所處市場周期

放免衰退期

酶免成長期

發(fā)光進入期

放免技術由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內(nèi)市場逐漸被淘汰，而化學發(fā)光試劑和設備比較昂貴，使得其在國內(nèi)的普及特別在計生系統(tǒng)普及需要較長時間，EIA技術穩(wěn)定，試劑價格合理，供應充，酶免技術在中國市場處于成長期，因此購買酶標儀正合適宜。

尤其要提到的是，在中國的計劃生育和婦幼保健系統(tǒng)配備酶標儀已經(jīng)迫在眉睫。早在幾年以前，世界衛(wèi)生組織已建議對孕婦進行TORCH 五項常規(guī)篩查，但是遺憾的是由于缺乏酶標儀和洗板機等設備，RCH的檢測在中國還未能普遍開展。TORCH感染在圍產(chǎn)醫(yī)學中稱為TORCH綜合癥，由于孕婦，胎兒和新生兒都易被感染，它已受到全世界婦產(chǎn)科和兒科的極大重視。

妊娠期感染不僅危害母體，往往還可對胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴重影響。通過胎盤可引起子宮內(nèi)感染而導致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長遲緩和畸形，通過產(chǎn)道和母乳可引起新生兒感染。如累及神經(jīng)系統(tǒng)可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰ORCH感染與優(yōu)生優(yōu)育有極為重要的關系。因此，RCH（IgG和IgM）檢查通常也稱為優(yōu)生優(yōu)育十項檢查。目前，TORCH的檢測方法主要有放免（RIA）和酶免（EIA）。由于放免方法需要特殊儀器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）方法取代。EIA方法具有特異性強，靈敏度高，簡單快速，成本低等優(yōu)點，只要配備有酶標儀和其他相應的設備，多數(shù)普通實驗室均可方便地開展。很顯然，盡快在計生系統(tǒng)普及酶標儀等設備是一個迫切的需求。

這項工作的落實將有助于提高診治水平，降低母嬰發(fā)病率，從而提高整個國民的健康素質(zhì)。目前市場上提供的EIA試劑越來越多，如：T3、 T4、TSH、TORCH系列、不孕系列、各種癌癥標志物、傷寒、副傷寒等，另外通過母嬰傳播的性傳播疾病（如淋病、梅毒、HⅣ）和肝炎（如HBV、 HCV），以及胎兒的抗體，新生兒TSH的測定，疫苗反應等，市場上也都有成套EIA試劑盒供應。使用酶標儀有利于拓展檢測項目，提高檢測水平，其社會效益和經(jīng)濟效益并舉。酶聯(lián)免疫吸附試驗方法簡稱酶標法，是標記技術中的一種，是從熒光抗體技術、同位素免疫技術發(fā)展而來的一種敏感，特異，快速并且能自動化的現(xiàn)代技術.

Eon 全波長酶標儀

BioTek Eon 全波長讀數(shù)儀具備微孔板和比色杯測量的雙重功能，既可作為全波長酶標儀，也可作為全波長分光光度計使用。比色杯類型包括標準比色杯，以及Biocell微量比色杯。波長范圍從200nm到1000nm，包括紫外和近紅外，可以自由選擇任何波長。

220V/50HZ

4--45℃

10%-90%。

酶標儀是一種精密的光學儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DINVDE0871條例，儀器應放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN45635－19條例：

儀器應放置在低于40分貝的環(huán)境下。

為延緩光學部件的老化，應避免陽光直射。

操作時環(huán)境溫度應在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15%－85%之間。

操作電壓應保持穩(wěn)定。

操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。

保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。

光柵光路系統(tǒng)，包括內(nèi)建的參比檢測通道，確保任何測量情況下獲得一致的結(jié)果。

長壽命閃爍氙燈光源，光柵單色光發(fā)生器，200 ~1000 nm波長范圍內(nèi)全波長掃描，1nm步進

在微孔板檢測模式和比色杯檢測模式下均可進行全波長范圍光譜掃描，對樣品和空白同時掃描。

10s，200~1000nm，1nm步進

無需衍生處理，即可直接測定DNA、RNA和蛋白的吸光值。

使用微孔板檢測時可直接讀出OD值和濃度，對于水相溶液可使用光程校正

可使用96&384孔板，或標準杯/微量杯

帶寬2.4nm

0 ~ 4 OD

@450nm：0 ~ 2.5 Abs，±2%

@450nm：1%+0.003 Abs（0~2.0Abs），2%(2.0~2.5Abs）

@450nm <1.0% CV

8s/96孔；13s/384孔

微孔板和比色杯模式均具溫控功能，溫控范圍（室溫+4)~ 65℃

軌道，雙軌道和線性三種調(diào)速振蕩模式，動力學過程中可執(zhí)行背景振蕩模式

通過PC端數(shù)據(jù)分析軟件Gen5進行操作和設置

曲線擬合、定量分析、定性分析、動力學計算、自定義方程以、平行線分析（PLA，符合歐盟法規(guī)要求）及效價分析等。數(shù)據(jù)可一鍵導出到Excel，也可生成詳盡的結(jié)果報告。

電源輸入 100 - 240 V (50/60 Hz），最大功率消耗 90W

外部尺寸（H x W x D) 216 x 216 x 406mm

11kg

全波長讀數(shù)儀一套（含比色杯基座）（比色皿必須為立式），標準96孔酶標板一包，電源線壹根，說明書一份，軟件光盤一張。

⒋1.1將酶標儀后部的電源開關燈打開，儀器將顯示自檢、基礎酶聯(lián)、軟件版本號，隨后顯示基礎酶聯(lián)、準備和時間。在自檢過程中，儀器對每一個已裝的濾光片選擇合適的光強度，開機后，等候1分鐘預熱。

⒋1.2開機后，測量模式1及其某些參數(shù)（如：單波長檢測、1號濾光片、不作數(shù)據(jù)計算，進板方式、無板統(tǒng)計分析和打印機方式）都已默認。

⒋2.1按下paper feed健，取下運輸中裝入打印機系統(tǒng)的紙張，將卷紙游離端插入儀器后部的插口，直至有輕微阻力感。注意卷紙轉(zhuǎn)動的正確方向。

⒋2.2按下paper feed健，直至將紙送入打印機。將卷軸插入卷紙，將卷軸及卷紙放入儀器后部的凹槽。

選擇程序模式時，先按shirt鍵，再按enter鍵。程序模式有：基礎酶聯(lián)軟件、凝集檢測軟件、臨界值定性軟件、曲線回歸定量軟件。在確定程序模式后，進入自檢并完成。在每個程序模式里選擇所需的測量模式和參數(shù)、計算模式和參數(shù)。按star健開始檢測。檢測后，結(jié)果會輸出至內(nèi)置打印機或通過接口輸出。

⒋3.1程序模式1——基礎酶聯(lián)軟件：在檢測前需選擇好測量模式和計算模式及參數(shù)。

⒋3.1.1測量模式和測量參數(shù)

⒋3.1.1.1測量模式：通過mode鍵來選擇，可通過↑↓鍵查看測量模式目錄。也可通過數(shù)字鍵來選擇測量模式。

⒋3.1.1.2測量參數(shù)：通過meas param鍵或enter鍵來選擇，也可通過↑↓鍵和和數(shù)字鍵輸入新參數(shù)。

可通過meas param鍵和enter鍵來選擇默認值或以前設定的值。

⒋3.1.1.3在程序模式1中有以下測量模式的供選擇：

⒋3.1.1.3.1單波長檢測：用單波長測量吸光值。

⒋3.1.1.3.2雙波長檢測：用雙波長測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.1.1.3.3雙時法檢測：在兩個不同的時間點上測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.1.1.3.4酶標動力學檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.1.1.3.5多波長檢測：每一列的吸光值用各自不同的波長檢測。

⒋3.1.1.3.6計算機控制檢測：儀器由一個外接計算機控制。

⒋3.1.1.4在程序模式1中有以下的測量參數(shù)可供選擇：

⒋3.1.1.4.1力學檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.1.1.4.2空白

4 .3 .1 . 1 . 4. 2 .1空白種類：以下空白種類可在1 .2 .3 .4和5中選擇。

1）無試劑空白。

2）單孔試劑空白：輸入空白孔位置。

3) 列平均空白：輸入空白列號（1－12）；采用該列空白值（8個）的平均值為空白值。

4) 列空白：輸入空白列號（1－12）；每行采用各自不同的空白值。

5) 行平均空白：輸入空白行號（A-H）；采用該行空白值（12個）的平均值為空白值。

6) 行空白：輸入空白行號（A-H）；每列采用各自不同的空白值。

⒋3.1.1.4.2.2空白形式：

1）每板都設空白：

2）固定空白：用前一板的空白值，若選固定空白，在檢測下一板前，須選擇1.用舊空白2.重設空白。

⒋3.1.1.4.3結(jié)果形式（在測量模式2、3、和4中可選擇）

⒋3.1.1.4.3.1最終結(jié)果：吸光值的差值。

⒋3.1.1.4.3.2全部結(jié)果：中間的全部結(jié)果（如濾光片1的吸光值，濾光片2的吸光值）。

⒋3.1.1.4.4時間設置：

⒋3.1.1.4.4.1間歇時間：（在測量模式3、和4中可選擇）

連續(xù)檢測板時的間歇時間。最短間歇時間為5秒，最長為17小時59分59秒。按時：分：秒輸入時間。

⒋3.1.1.4.4.2延遲時間：（在測量模式4中可選擇）

即在測量開始前的一段時間，最小延遲時間為0秒，最長為17小時59分59秒，按時：分：秒輸入時間。4.3.1.1.4.4.3全部時間：（在測量模式4中可選擇）

即整個反應所需時間，最小延遲時間為5秒，最長為17小時59分59秒，按時：分：秒輸入時間。

⒋3.1.2計算模式和計算參數(shù)

⒋3.1.2.1計算模式：用calc mode（計算模式）鍵設定?？捎眉^前后查找計算模式目錄。

⒋3.1.2.2計算參數(shù)：用calc param（計算參數(shù)）或enter（回車）鍵設定計算參數(shù)。

⒋3.1.2.3請在程序模式1中選擇以下的計算模式及參數(shù)：

⒋3.1.2.3.1無計算：結(jié)果以吸光值形式輸出至內(nèi)置打印機或通過界面接口輸出。

⒋3.1.2.3.2因數(shù)計算：測出的吸光值和用戶給出的因數(shù)相乘得出濃度，濃度單位由因數(shù)單位確定。

⒋3.1.2.3.3線性標準：用戶輸入標準品濃度，酶標儀通過這些標準品，利用最小平方法回歸出一條標準直線，可將測得的吸光值換算成濃度。

⒋3.1.2.3.4標準直線：用戶輸入已知標準直線的斜率和截距來確定標準直線multiskan ms酶標儀用以下直線方程式計算濃度：濃度=A（斜率）×吸光值+B（截距）。

⒋3.1.2.3.5限值計算：測出的吸光值與用戶定義的一個限值比較，如結(jié)果低于限值，會出現(xiàn)負號，相反，會出現(xiàn)正號。

⒋3.1.2.3.6雙限值：測出的吸光值與用戶的兩個限值比較。如結(jié)果低于兩個限值，會出現(xiàn)負號。如結(jié)果在兩個限值之間出現(xiàn)0，如結(jié)果高于兩個限值，會出現(xiàn)正號。

⒋3.1.2.3.7范圍計算：用戶定義的數(shù)值被分成10個部分，10個部分編號為0－9。測出的吸光值根據(jù)它所在的部分以0－9中的編號反映出來。

⒋3.1.2.3.8列減法：第二列的結(jié)果減去第一列結(jié)果，第四列的結(jié)果減去第三列結(jié)果，反之。

⒋3.1.2.3.9兩點法：用戶輸入標準品濃度，multiskan ms酶標儀通過標準品計算出一條線性標準曲線。通過這一曲線，將測得的吸光值轉(zhuǎn)換成濃度。

⒋3.2程序模式2：凝集反應軟件（供選）

將ms酶標儀與計算機連接，進入ms程序模式2。選擇濾光片、空白及參數(shù)。在計算機上啟動計算機控制。開始測量，每孔將測得20個數(shù)據(jù)并輸出至計算機。

⒋3.3程序模式3：臨界值定性軟件（可選）

⒋3.3.1程序模式3中有以下測量模式可選：單波長、雙波長、雙時法、動力學方法。

⒋3.3.2程序模式3中有以下測量參數(shù)可選：

⒋3.3.2.1濾光片

⒋3.3.2.2空白

⒋3.3.2.2.1空白種類：

1）無試劑空白

2）單孔試劑空白

3）列平均空白

4）列空白

5) 行平均空白

6）行空白

⒋3.3.2.2.2空白形式：

1) 板都設空白

2）固定空白

⒋3.3.2.3結(jié)果形式（在測量模式2、3、4中選擇）

⒋3.3.2.3.1最終結(jié)果：吸光值的差值。

⒋3.3.2.3.2全部結(jié)果：中間的全部結(jié)果（如濾光片1的吸光值，濾光片2的吸光值）。

⒋3.3.2.4時間設置：

⒋3.3.2.4.1間歇時間 （在測量模式3、4中選擇）

連續(xù)檢測板時的間歇時間。最短間歇時間為5秒，最長為100分。按分：秒輸入時間。

⒋3.3.2.4.2延遲時間 （在測量模式4中選擇）

即在測量開始前的一段時間，最小延遲時間為0秒，最大為100分。按分：秒輸入時間。4.3.3.2.4.3全部時間（在測量模式4中選擇）

即整個反應所需時間，最小時間為5秒，最大為100分。按分：秒輸入時間。

⒋3.3.3以下計算模式及他們的參數(shù)可在程序模式3中設定：

⒋3.3.3.1無計算：結(jié)果以吸光值輸出至內(nèi)置打印機或通過界面接口輸出。

⒋3.3.3.2雙限值：測出的吸光值與用戶定義的兩個限值比較。如結(jié)果低于兩個限值，會出現(xiàn)負號。如結(jié)果在兩個限值之間出現(xiàn)0，如結(jié)果高于兩個限值，會出現(xiàn)正好。

⒋3.3.3.3范圍計算：用戶定義的數(shù)值被分成10個部分，10個部分編號為0－9。測出的吸光值根據(jù)它所在的部分以0－9中的編號反映出來。

⒋3.3.3.4臨界值：測得的吸光值與臨界值（用陽性或陰性對照測得的吸光值，通過臨界值方程式計算所得）進行比較。

⒋3.4程序模式4：曲線定量軟件（供選）

⒋3.4.1在程序模式4中有以下測量模式：

⒋3.4.1.1單波長檢測：用單波長測。

⒋3.4.1.2雙波長檢測：用雙波長測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.4.1.3雙時法檢測：在兩個不同的時間點上測量吸光值。第二次檢測結(jié)果從第一次檢測中減得。

⒋3.4.1.4動力學檢測：測量吸光值的變化速度。

⒋3.4.2在程序模式4中有以下測量參數(shù)可選：

⒋3.4.2.1濾光片：在測量模式1234中輸入濾光片的波長或濾光片號碼。

⒋3.4.2.2空白。

⒋3.4.2.3結(jié)果形式。

⒋3.4.2.4時間設置。

⒋3.4.3在程序模式4中有以下計算模式和參數(shù)：

⒋3.4.3.1無計算：結(jié)果以吸光值形式輸出至內(nèi)置打印機或通過界面接口輸出。

⒋3.4.3.2曲線定量：是S行曲線，例如用于激素和腫瘤標記物的定量測定。

⒋3.4.3.3計算參數(shù)：

標準品個數(shù)：　 允許設2－8個標準品

每個標準品重復孔數(shù)：　 每個標準品允許1－3個重復孔

標準品1的濃度：　 輸入標準品1的濃度

標準品1的重復孔位置： 輸入標準品1重復孔的位置

標準品2的濃度 ：　 輸入標準品2的濃度

標準品2的重復孔位置 ：　 輸入標準品2重復孔的位置

每板都設標準品或固定標準品。

單位：無單位U/L，mIU/L，g/l，mg/l，ug/l，ug/ml，ng/ml，mmol/l，umol/，nmol，nmol/l

坐標1：LIN/LIN

坐標2：LIN/LOG

坐標3：LOG/LIN

坐標4：LOG/LOG

在測量結(jié)果和數(shù)據(jù)傳送后，用戶需選擇1（接受結(jié)果）或2（重設新坐標）。如結(jié)果被接受，儀器會處于READY狀態(tài)，如需重設坐標，需選擇訓新的坐標參數(shù)并按下PRINT鍵。新的結(jié)果將輸出。如使用固定標準品，需選擇：1.用原有曲線2.使用新曲線。

⒋4.1在程序模式1和2中，可使用一個外接計算機取代酶標儀上的鍵盤。

⒋4.2計算機控制通過RS-232C接口實現(xiàn)。

⒋4.3計算機控制由選擇測量模式6中實現(xiàn)，也可在儀器設置DTR為高級狀態(tài)并且儀器顯示READY后輸入一個R命令實現(xiàn)。

⒋4.4回到鍵盤操作：按STOP鍵或輸入Q命令。

⒋5.1用戶設定的程序可儲存在儀器內(nèi)存中，以備后用。

⒋5.2儲存可用SAVE鍵后，儀器要求給出程序編號（1－4），輸入程序編號，儀器將顯示“儲存數(shù)據(jù)”。

以后要使用儲存程序時，按RECALL鍵調(diào)出，并輸入該程序編號即可。

酶標儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應結(jié)果，因此要得到準確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標儀之前是通過目測判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標儀后如果不能及時糾正操作習慣，會造成較大誤差。在酶標儀的操作中應注意以下事項：

使用加液器加液，加液頭不能混用。

洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機洗板，避免交叉污染。

嚴格按照試劑盒的說明書操作，反應時間準確。

在測量過程中，請勿碰酶標板，以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手。

請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手。

如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害，請嚴格按照試

劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。

如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請進行清洗和消毒。

不要在測量過程中關閉電源。

對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，應根據(jù)實際情況及時修改參數(shù)，以達到最佳效果。

使用后蓋好防塵罩。

出現(xiàn)技術故障時應及時與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸酶標儀。

一、 常見故障

1、 打印機不工作

⑴ 酶標儀后部DIL開關設置不正確。DIL標準設置：左 下下下下下下上下 上上下下上下上上 右（人站在儀器后部，面向儀器）。

⑵ 酶標儀內(nèi)置打印機開關處于開的位置。應在總參數(shù)中設置內(nèi)置打印機為關。

⑶ 打印機接口接錯（接在了計算機接口上了）。應將打印機聯(lián)系接在DIL開關正下方的打印機接口上，RS-232接口為計算機接口。

⑷ 打印機聯(lián)線有問題：有些配備的新打印機聯(lián)線仍有問題，請確保打印機聯(lián)線無問題。

⑸ 打印機未聯(lián)機，請確認打印機上的聯(lián)機鍵已聯(lián)機。

⑹ 打印機無紙或紙未裝好，請裝好打印紙。

⑺ 有些打印機有開機順序，有的需先開打印機，后開儀器；有的需先開儀器，后開打印機。

2、 調(diào)不出所編程序

必須在相應程序模塊下調(diào)出。如在臨界值模塊下編輯儲存的程序必須要在臨界值模塊下調(diào)出。

3、 肉眼結(jié)果與酶標儀測定結(jié)果差異較大

⒊1 濾光片設置不正確：請在“參數(shù)”中按濾光片輪中實際的情況設置濾光片。

⒊2 空白或陰性位置不正確。

二、 儀器的檢查測試

1、 檢測電源部分的輸出電壓

電源部分輸出電壓可以通過檢測MUSCU板上X11元件得到，每個點的正確對地電壓應該是（順序為從左至右）：5V、0V（地電壓）、15V、24V、-15V、0V。

2、 光源電壓的測試和調(diào)節(jié)

測量光源電壓，如果發(fā)現(xiàn)所測的結(jié)果不符合規(guī)定要求可以調(diào)節(jié)電源上的R39元件。其操作步驟如下：

⑴ 打開電源開關，使儀器處在工作狀態(tài)。

⑵ 用電壓表測量光源電壓，正常電壓應在6.7～6.9V之間。

⑶ 選擇405nm波長的程序，按“開始”鍵，同時測量光源處電壓，正常值應在7.5～8.1V之間。

⑷ 如果光源電壓不正常，關閉電源開關。旋松測量部分上蓋螺絲并移去上蓋。

⑸ 旋松軌道部分的固定螺絲并移動軌道部分（要特別小心以防損傷軌道部分和主板及電源部分的連線?。?，能看到軌道下面的電源即可。

⑹ 打開電源開關，調(diào)節(jié)電源上R39元件，再重復上面步驟2測量光源電壓，一直到正確為止。

三、 儀器的校正

1、 調(diào)節(jié)顯示屏幕的亮度

這可以通過調(diào)節(jié)MUSCU板上的R14元件來實現(xiàn)。

2、 檢查同步性

⑴ 轉(zhuǎn)動斷路器輪

把示波器的探針接在電路板MUSCU2的D29元件的第二個腳上測定信號的周期，正確的值應該介于5.1ms～5.4ms之間。如果超出這個范圍，可以通過調(diào)節(jié)CHOPT電路板上R3元件來校正。檢測活動結(jié)束后要用帶有顏色的漆鎖定它的正確位置。

⑵ 檢查同步性

a） 按“計算模式”鍵，選擇1“調(diào)整”，再按“輸入”鍵選擇9“連續(xù)測量”，再按“輸入”鍵兩次選擇增益0，并按“輸入”鍵。

b） 當在MACU2板D7元件的第14腳上測量信號的A/D轉(zhuǎn)換時，測得的時段信號應該在信道的中間。如果不符，可以通過上下移動CHOPT板來調(diào)整。

3、 調(diào)整時鐘頻率

⑴ 按“計算模式”選擇1“調(diào)整”，再按“輸入”選擇10“時鐘頻率”，再按“輸入”。

⑵ 用頻率計數(shù)器在MUSCU板上的D28元件的第13腳處測定時鐘頻率，正確的值應該為fck=32768Hz。這可以通過調(diào)節(jié)該板上的電容器C4來校正。

⑶ 值得注意的是，在這個測定過程中不能用“停止”鍵中斷這個過程。

4、 存儲機器的系列號

按“計算模式”選擇2“測試”，按“輸入”選擇4“重復性20次”，按“輸入”鍵兩次。輸入機器號（353……），按“停止”兩次。

四、 儀器的檢驗

1、 重復性：

在一定條件下所獲得的獨立的測定結(jié)果之間的一致性程度即可重復性，可用CV值來表示。在某一特定的濾光片下測定某一塊酶標板20次，用統(tǒng)計學方法求出所有測量值的均值和標準差。公式如下：

所有測量值的標準差

CV %= ————————————×100%

所有測量值的均值

2、 精確性：

待測物的測定值與一可接受的參考值之間的差異。此項指標需用雷勃公司標準板（PVT）來測。

測量值 - 參考值

精確性= —————————— ×100%

參考值

3、 光路檢測：

將一塊酶標板正放測量一次，再將酶標板反放測量一次，查看同一孔吸光值是否相同，從而查看其所有光路8通道是否均一。

⑴ 查看光路上的透鏡是否清潔。

⑵ 燈泡好否及亮度是否正常。

⑶ 濾光片是否清潔。

4、 載軌運動：

開機后酶標儀能否自檢，自檢結(jié)束后撳“開始”，查看載軌運動是否正常及有無噪聲。

5、 按鍵膜的好壞：

開機后試用所有按鍵膜，查看其功能是否完好。